オートクレーブの滅菌有効性の検証
投稿者 管理者 | 14 Apr
微生物学研究所で最も重要な機器の1つは滅菌剤であり、オートクレーブ（高圧蒸気滅菌器）が最も一般的に使用されています。 GB 4789.1-2016によると、実験装置は、適切なパフォーマンスと運用安全性を確保するために、定期的に検査および/または調整し、維持され、サービスを提供する必要があります。しかし、あなたのオートクレーブはそのような検査を受けましたか？そして、あなたが検証を実行したい場合、あなたはそれをどのようにすべきですか？今日は、オートクレーブの滅菌効果を検証するための重要な方法を要約します。
オートクレーブの滅菌効果の検証には、一般に、化学インジケーター、最大温度計、自己メイド温度チューブ、生物学的指標などの方法が含まれます。これらの方法は、同様の原則を共有していますが、滅菌剤が滅菌中に必要な温度に達するかどうかを主に確認しますが、ラボの特定の条件に基づいて1つ以上を選択できます。
1。化学インジケータ法
原理：化学指標は、特定の温度と時間条件下で色または形状の変化を受けます。この変更は、滅菌パラメーターが満たされているかどうかを判断するために使用されます。
研究所で一般的に使用されるアイテムは、滅菌後に色を変える3Mオートクレーブインジケーターテープです。テープは、熱感受性化学物質、カラー開発者、塗装材料で作られており、接着テープのストライプパターンで印刷されています。滅菌パッケージの外側に直接適用され、最小長さは5 cmです。テープを軽く押して、良好な接着とシーリングを確保します。 121°Cに20分間、または130°Cで4分間曝露した後、テープの斜めの白いストライプは完全に黒くなるはずです。色の変化が不均一または不完全な場合、パッケージは適切に滅菌されていないと見なされます。
2。最大温度計メソッド
原理：この方法では、従来の医療温度計と同様に、加熱されると低温に戻らない水銀温度計を使用します。滅菌中に達する最大温度を示します。
検証のために、水銀温度計を水で満たされたエルレンマイヤーフラスコ内に置きます。滅菌中に、フラスコをオートクレーブの上部と下部に配置します。プロセス後、温度計の読み取りが必要な温度と一致するかどうかを確認します。この方法は温度を検証することのみができ、滅菌時間要件が満たされたかどうかを確認できないため、オートクレーブの検証の最小標準を表します。
3。自作の温度チューブ法
原理：この方法は、特定の温度で溶けて再結晶する特定の化学物質を利用し、冷却後の特徴的な結晶形を使用します。これらの化学物質は小さなガラス管に密閉され、オートクレーブ内に配置されています。滅菌後、結晶の形状を調べて、正しい温度に達したかどうかを判断します。
ベンゾ酸は一般的に使用されており、融点は121〜123°Cで、オートクレーブの標準滅菌温度と整列しています。固体ベンゾ酸を小さなガラスチューブに密閉し、オートクレーブに入れます。滅菌後、ベンゾ酸の状態が観察され、ターゲット温度が達成されたかどうかを確認します。最大温度計と同様に、このアプローチは温度を検証するだけでなく、滅菌期間ではありません。
4。生物学的指標法
原理：この方法は、熱滅菌の有効性を評価するために、指標生物としてジオバチルスstearothermophilusの非病原性胞子を使用しています。これらの胞子は非常に耐熱性があり、耐性は病原性クロストリジウムボツリヌス胞子と同様であり、滅菌効果を検証するための適切な指標になっています。
生物学的指標には、胞子懸濁液、胞子ストリップ、および統合された胞子と中央のチューブの3つの形式で利用できます。これらは通常、滅菌容器内の5つの場所に配置されます。下層の前面、中央、背面、および上層層と中間層の中心点です。滅菌後、指標はブロモクレソール紫色 - グルコース - ペプトン水に接種され、55〜60°Cで2〜7日間インキュベートされます。培地の色が透明で変化しない場合、胞子が殺され、良好な滅菌が示されました。培地が黄色で乱流になった場合、胞子は生き残り、滅菌性能が低いことを示唆しています。胞子の懸濁液と胞子ストリップの両方が同じ検証プロセスに従います。
市販の生物学的インジケータチューブは、研究所でも一般的に使用されています。それらには、Geobacillus stearothermophilusの胞子と、成長培地を備えた密閉されたガラスのampouleが含まれています。チューブは、滅菌容器全体に配置されています。オートクレーブ後、ガラスのampouleを粉砕して培地を放出し、チューブを陽性対照とともに56°Cでインキュベートします。滅菌が不十分な場合、生き残った胞子は成長し、スープを黄色に変えます。滅菌が効果的である場合、胞子は不活性化され、スープは紫色のままです。
検証頻度
現在、オートクレーブの有効性の検証の頻度に関する厳格な国家基準はありません。研究所は、独自の検証スケジュールを確立し、厳密にそれらに固執することが期待されています。結果の使いやすさと信頼性の両方を考慮すると、生物学的インジケーターチューブと組み合わせてインジケーターテープを使用することをお勧めします。それらは、簡単な動作と滅菌効果の包括的な検証を提供するためです。
滅菌に関するメモ（いくつかの輸入された完全自動オートクレーブには必要ありません）
高圧蒸気滅菌器を使用する場合、蒸気が放出されるときにチャンバー内のすべての冷気を追放することが重要です。排気バルブを閉じた場合にのみ、すべての冷気が取り除かれた後にのみ。空気が残っている場合、圧力計は正しい圧力を示す可能性がありますが、チャンバー内の実際の温度は不足します。空気が保持されるほど、圧力と温度の矛盾が大きくなり、潜在的に不完全な滅菌が生じます。 （これは、多くの場合、発酵媒体の滅菌中に観察されます。そこでは、空気が小さなガイドチューブに残っているため、冷たい空気をより徹底的に使い果たします。）
